授课大纲
理论内容:
一、宏基因组学
1. 16S rDNA AMPLICON SEQUENCING 法
1.1. 测序平台、引物设计及区域选择不同测序平台、针对细菌、真菌不同微生物实验设计
1.2. 测序量及采样建议
针对水体、粪便、土壤、物体表面、口腔等不同生境
1.3. 分析流程图
数据收集、数据预处理、数据分析
1.4. 结果解析
1.4.1 OTU聚类
1.4.2 物种注释
1.4.3 物种分布情况
1.4.4 样品复杂度分析:α多样性
Coverage
Chao指数
ACE指数
Shannon曲线
Richness rarefaction曲线
1.4.5 多样品比较分析:β多样性
样品间物种丰度热图
排序分析:
PCA分析
PCoA分析
NMDS分析
Unifrac分析
样品聚类分析
2. DSS (direct shotgun sequencing)法
2.1. 分析流程
2.2. 功能注释分析
2.3. 代谢途径解析
二、宏转录组学
1 介绍
2 物种组成、功能及代谢途径分析
宏基因组优势菌分析
1.泛基因组分析
2.宏基因组中的优势菌株单基因组分析
上机实习:
一、宏基因组中的优势菌株单基因组常规分析流程
1.原始数据评估 (fastqc)
2 基因组拼接、画图(CGview等)
3 功能注释 (KEGG、CARD、Resfinder等)
4 进化树分析 (MEGA、evolview)
5 多菌株泛基因组分析 (PanGP)
二、宏基因组学(16S部分)介绍以及上机操作
1.Virtual box 及Qiime2 安装
2.Linux基础知识介绍
3.Qiime2:数据处理,
质控,
生成feature,
进化树构建,
多样性分析,
差异分析,
物种注释
三、R语言基础及宏基因组相关统计分析
1.常用基本命令
变量赋值
文件读写
常用的统计函数
2.差异OTU及差异菌群分析
wilcox检验
3.相关性检验
差异OTU与样本临床信息相关性检验
4.alpha多样性
5.beta多样性
6.PCoA
7.机器学习
逻辑回归
随机森林
svm
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