图 trans-AT聚酮合酶在Lankacidin类天然产物生物合成中的独特迭代作用方式

　　在国家自然科学基金项目（批准号：81925033）等资助下，南京大学戈惠明教授、谭仁祥教授和张博副教授研究团队，在trans-AT聚酮合酶的生物合成作用机制研究方面取得进展。研究成果以“Lankacidin类天然产物生物合成中trans-AT聚酮合酶的独特作用机制研究（Insight into the role of a trans-AT polyketide synthase in the biosynthesis of lankacidin-type natural products）”为题，于2024年10月发表于国际学术期刊《自然•合成》（Nature Synthesis）杂志。论文链接：https://www.nature.com/articles/s44160-024-00599-1。

　　Lankacidin类天然产物是含大环内酯结构的聚酮肽杂合类天然产物，具有抗菌、抗肿瘤等活性，是由trans-AT聚酮合酶（trans-AT PKS）合成。前人研究发现，在lankacidin类天然产物的生物合成过程中，四个trans-AT聚酮合酶模块却负责八轮聚酮骨架的延伸，因此学术界长久以来认为该trans-AT PKS进行了未知的迭代作用，但一直没有找到证据。

　　该研究团队通过蛋白质异源表达和体外生化反应，成功重建了整个trans-AT聚酮合酶生物合成途径，搭建了体外生成系统。通过化学合成潜在中间体、体外重构和捕获生物合成中间体，阐明了trans-AT聚酮合成酶在lankacidin类天然产物生物合成中的特殊迭代作用。此外，还对trans-AT PKS中跨模块作用的MT结构域、冗余的KS-ACP结构域等进行了功能表征。以经典I型聚酮的“模块化思维”对trans-AT聚酮合酶进行拆分和重构，并体外对新产生的模块化trans-AT PKS进行功能验证。将全部trans-AT聚酮合酶进行融合，产生出~763 KDa的重组酶并在大肠杆菌中实现了相应天然产物的生产，为trans-AT PKS的特殊迭代作用过程提供了直接实验证据。进一步研究表明，CheC酶具有独特的KR–MT–ACP–ACP–KS–DH结构域，这一结构不仅能够与前后的trans-AT聚酮合酶线性协作，构成完全功能的模块，而且还能通过潜在的环形结构自行组装成一个非常规模块，促进生物合成过程中多轮聚酮延伸（图）。

　　该研究挑战了传统的线性聚酮合酶的合成机制，揭示了trans-AT聚酮合酶在生物合成中的新功能，为未来trans-AT聚酮合酶的合理设计和工程化改造提供了新的思路，也为聚酮肽杂合类天然产物的新药研发提供充足原料。